北京中儀光科作為奧林巴斯顯微鏡,尼康顯微鏡在中國(guó)地區(qū)的經(jīng)銷商,為北京顯微鏡購(gòu)買(mǎi)者提供zui的服務(wù).我們公司長(zhǎng)期供應(yīng)工業(yè)顯微鏡,體視顯微鏡,金相顯微鏡,倒置顯微鏡,偏光顯微鏡,熒光顯微鏡,生物顯微鏡等等一系列產(chǎn)品。
生物顯微鏡的成像原理(二)
三、顯微鏡照明系統(tǒng)
為了獲得良好的工作效果,生物顯微鏡必須注意照明的正確使用。生物顯微鏡的照明方式按其用途可以分成3類。
1.用透射光照明。在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)檢驗(yàn)上用的zui多zui廣,一般在數(shù)值孔徑小的低倍物鏡,可采用一種zui簡(jiǎn)單的照明器,用一凹面鏡(或平面鏡),使白然光經(jīng)凹面鏡后被會(huì)聚在載物片的樣品上。對(duì)于高倍鏡或油浸物鏡,必須采用專門(mén)的聚光器,位寬大的平行光束經(jīng)集光鏡后被會(huì)聚成與物鏡孔徑相適應(yīng)的錐形光束,方能滿足物鏡分辨本領(lǐng)的需要。而另一方面也增加了樣品的亮度。采用透射光照明,還有兩種方法,一種是將光線聚焦在標(biāo)本上,稱作臨界照明,如果光源表面亮度不均勻.則在載物片上也反映出來(lái),如燈絲像等。在微型顯微鏡中,為了消除這一缺點(diǎn),在案光器下面的藍(lán)色濾光片的一面.采用磨砂而減少僚的亮度不均勻現(xiàn)象。另一種方法叫庫(kù)勒照明,如圖3—3所示。由光源發(fā)出的光先經(jīng)過(guò)毛玻璃L,再經(jīng)過(guò)透鏡K把毛玻璃的像里在案光器下部的光欄J2處,集光器把光欄J1的像呈在物面上,并且把J2像呈在無(wú)限遠(yuǎn),這種照明,即使光源本身亮度不均勻,而在標(biāo)本上的照明也是十分均勻的。而且調(diào)整好J1的孔徑,還可以減少雜散光的影響。
2。用于非透明體的照明。對(duì)于非透明體光線不能透射,這時(shí)只能從側(cè)面斜射照亮標(biāo)本,如圖3—4所示。當(dāng)用低倍物鏡時(shí),有一定的工作距離,可以從上邊或旁邊照射被觀察物的表面,使漫射光進(jìn)入物鏡,這時(shí)不能用蓋玻片,否則規(guī)則的反射光將進(jìn)入物鏡影響觀察。因?yàn)槭菃蜗騻?cè)面照明,這樣被觀察的標(biāo)本可能有些變形。為了糾正這一缺點(diǎn),還可以把物鏡放在環(huán)形光束中,采用全向照明。
3.用暗視場(chǎng)觀察微粒的照明。在通常的阿貝集光器下面,加一個(gè)環(huán)形光闌,將中間光線遮住.僅使邊緣光線進(jìn)入集光,由于光線沒(méi)有直接進(jìn)入物鏡,因此視場(chǎng)背景是暗的,可以做暗視場(chǎng)的透明體觀察。這種照明對(duì)于線形或點(diǎn)形,細(xì)微結(jié)構(gòu)透明體觀察.如矽藻完皮、動(dòng)植物的各種組織、血液和含有細(xì)菌的液體等有較好的效果,如圖3—5所示。
應(yīng)用暗視場(chǎng)集光器來(lái)觀察標(biāo)本,必須在夜間或暗室中進(jìn)行,光源越強(qiáng)越好。用陽(yáng)光直射、弧光燈或500支光電燈都行,但須使光線平行地射到反光鏡上。這可在光源與顯微鏡之間安插一塊凸透鏡,或用500mL燒瓶盛10%硫酸飼溶液,將光源剛好放在焦點(diǎn)處即可。所用的接物鏡的鏡口率只宜在1.0左右,太高則看不清物像。新式接物鏡管內(nèi)多安裝有小型光闌,可以隨意改變鏡口率的大小。
用普通生物顯微鏡也可以得到暗視場(chǎng)的效果:即將集光器卸下,并且把反光鏡盡量歪在一邊使反射后的光線不能直接射人接物鏡,則可得到相類似的結(jié)果。此種方法所得的光線僅只能從某一方面照射,如圖3—6所示。所以效果較差,而且只能在低倍鏡中使用,在高倍鏡和油浸系使用效果都不好。
如想光線能從各方面照射,而—時(shí)又無(wú)暗視物集光器,則可將普通明視場(chǎng)集光器稍加改變即可。即在集光鏡下面加一黑色之光擋,把來(lái)自反光鏡的光柱的中央部分遮掉,允許邊緣簡(jiǎn)狀光線進(jìn)入集光鏡。所遮掉的光的面積應(yīng)等于接物鏡的鏡口率,只有這樣才不致有光線直接射入接物鏡,如圖3—7所示。圖中,斜線表示直穿的光線,虛線表示反射的光線。另外一個(gè)方法就是將集光鏡上面一個(gè)透鏡的下面中央部用黑漆涂掉或剪一塊圓形黑色紙粘住即可,面積大小也應(yīng)剛好等于接物鏡的鏡口率,這和用遮光板的作用是一樣的。另外在接物鏡上組透鏡的上面,用適當(dāng)大小的黑紙片遮去中心部的光線,或是在眼點(diǎn)處設(shè)法遮掉中心部光線.然后用光鬧遮掉四周光線,也可得到較好的效果。要想得到良好的暗視場(chǎng)觀察.必須配備整套暗視場(chǎng)裝量為*。
四、生物顯微鏡的蓋玻片及載玻片
在360—780mm的光譜范圍內(nèi),其光吸收應(yīng)為zui小。在正常目視觀察下,不應(yīng)有任何斑點(diǎn)、氣泡、條紋和夾雜物。此外,應(yīng)消除應(yīng)力,無(wú)放射背景熒光。
就其化學(xué)穩(wěn)定性而言,對(duì)正常用于顯微術(shù)中的浸液、溶劑、標(biāo)本等,必須是化學(xué)惰性。
蓋玻片在光學(xué)設(shè)計(jì)時(shí)常作為物鏡的一部分,和物鏡一起消像差,因此其材料和厚度必須加以規(guī)定。
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