顯微鏡的zui大數(shù)值孔徑可達(dá)1.5υm左右，在這種情形下：

即在這種顯微鏡里，仍可分辨的兩點(diǎn)間zui短距離差不多等于所用光波波長(zhǎng)的1／3。假定綠光的光波的波長(zhǎng)λ＝5.46xl0ˉ5cm，那么顯微鏡能分辨的zui短距離為：

則這臺(tái)顯微鏡的zui高分辨距離也超不過0.182υm。向眼在明視距離（250M）能分辨的兩點(diǎn)之間zui短距離為0.1mm，約為上述d值的560倍，因此1臺(tái)光學(xué)顯微鏡的放大率有1000倍也就足夠了。這是因?yàn)楣獾谋拘约肮獾睦@射現(xiàn)象就限制了顯微鏡的放大極限。凡是光波超過微粒直徑的2倍時(shí)，光線就很方便地繞過微粒而繼續(xù)前進(jìn)，所以普通干燥系顯微鏡的zui大鑒別率只能達(dá)到光源波長(zhǎng)的1／2，直徑小到0.2υm的微粒就無法被光學(xué)顯微鏡發(fā)覺。雖然后來應(yīng)用浸潤(rùn)系方法，如油鏡，提高了折射率，其鑒別率也只不過能提高到光源波長(zhǎng)的1／3而已。而且還要用的透鏡才能達(dá)到。

2．顯微鏡的放大率

對(duì)于有一定大小的細(xì)節(jié)，除應(yīng)該用適當(dāng)?shù)臄?shù)值孔徑的物鏡而外，整個(gè)顯微鏡也應(yīng)該有適當(dāng)?shù)姆糯蟊稊?shù)與之相適應(yīng)，才能看清細(xì)節(jié)，這種放大倍率稱之為有效放大率。這是實(shí)際下作應(yīng)該考慮的問題，每個(gè)物鏡都有它的有效放大率。

在使用生物顯微鏡過程中，每個(gè)物鏡都配多大的倍數(shù)的目鏡，應(yīng)該特別注意。一般而言，顯微鏡的zui高放大倍數(shù)不得超過所使用物鏡鏡口率（NA）的1000倍，否則即產(chǎn)生畸變而失真。例如，其物鏡的放大倍數(shù)為lO×，為0.25，則0.25x1000＝250，即與這個(gè)物鏡配合使用的接目鏡其放大倍數(shù)不應(yīng)超過25倍，因?yàn)?5×10＝250。與油浸系配合的目鏡放大倍數(shù)應(yīng)更小些，例如，有一個(gè)l00x，N•A為1．4，則1．4x1000＝1400，即接目鏡的放大倍數(shù)不應(yīng)超過14×，因?yàn)?4×100＝1400。通?？偸堑捅段镧R配合高倍目鏡，高倍物鏡配合低倍目鏡，便是這個(gè)道理。

目前生物顯微鏡一般油浸物鏡NA＝1.25或1.3左右，所以，一般放大1250或1350倍已經(jīng)夠了，而zui大川為1．5，所以國(guó)家規(guī)定顯微鏡的zui高倍數(shù)為1250倍，而通常顯微鏡zui高倍咖良少超過1500倍。如果1臺(tái)顯微鏡zui高放大2500倍，實(shí)際上放大1000倍時(shí)有鑒別率。放大倍數(shù)太大，也是無效的．因?yàn)榉糯蟮揭欢ㄏ薅群?，把像再放大也不?huì)使我們看到更小些的細(xì)節(jié)，如果勉強(qiáng)放大，只會(huì)使像變得模糊反而影響清晰。也有超過1500倍的，其實(shí)也就是目鏡倍數(shù)大了一些，這是為了照相或投影之用。

4．幾個(gè)有關(guān)的概念

（1）顯微鏡的機(jī)械管長(zhǎng)。是指從任何——個(gè)接物鏡的接合螺絲抵肩換器吻合處起，到接口鏡筒上緣止的這一段距離而言為機(jī)械管長(zhǎng)。

如有抽筒則指還未被拉起的長(zhǎng)度．抽筒可從150mm拉到250mm。在干燥系中是使用顯微鏡岡有的鏡筒長(zhǎng)度或抑筒未被拉起的長(zhǎng)度c油浸系則須拉抽簡(jiǎn)拉到170M，當(dāng)觀察不透明的物體時(shí)，便應(yīng)拉到190mm或250mm，這也是機(jī)械管長(zhǎng)。現(xiàn)在一般無抽筒顯微鏡或有抽筒而未被拉起時(shí)．多固定為160mm。

（2）生物顯微鏡的光學(xué)管長(zhǎng)。是指從接物鏡的上焦面起，到接目鏡下主焦面止，這段距離而言為光學(xué)管長(zhǎng)。

它的簡(jiǎn)單測(cè)定方法：從接物鏡上組透鏡的亡面量到接目鏡的光欄環(huán)隔為止，約得1個(gè)近似數(shù)值。在干燥系情況下，多為140mm，也可小至128mm以下，油浸系則可高到180mm以上。光學(xué)管長(zhǎng)關(guān)系著次級(jí)放大倍數(shù)，非常重要。

（3）顯微鏡的操作距離。是指接物鏡下端與蓋片之間的距離而言，為操作距離。

一般鑒別率小者則操作距離大，反之則小。因?yàn)椴僮骶嚯x大，鏡口角一定小，于是鏡口率也小，即吸收光量的能力弱，所以鑒別率就受到限制。反之操作距離小，則接物鏡與蓋片越接近，則鏡口角就大，而吸收光量也相應(yīng)增大，鑒別率自然會(huì)增強(qiáng)。

一般顯微鏡的操作距離為16—0.65mm，但也有長(zhǎng)至55mm而短至O.5mm的。

（4）明視距離。出于眼睛的調(diào)節(jié)作用，所看清楚的zui遠(yuǎn)和zui近的兩點(diǎn)，分別叫遠(yuǎn)點(diǎn)和近點(diǎn)，正常眼遠(yuǎn)點(diǎn)無限遠(yuǎn)處，近點(diǎn)在10—15cm。當(dāng)物體距離眼睛25cm時(shí)，在人眼的視網(wǎng)膜上造的像zui為清晰。而且看起來不易感到疲勞，這個(gè)距離叫明視距離。顯微鏡的明視距離規(guī)定為25cm，就是這個(gè)道理。

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