暗場顯微鏡原理
要查看標本在暗視野,一個不透明的光盤置于下方的聚光鏡,所以,*的光線是由分散在幻燈片上的對象可以達到眼(圖2)。而是通過試樣,光反映在幻燈片上的粒子。一切是可見的,不分膚色,通常對一個黑暗的背景明亮的白色。染色的對象往往是在看到“假色”,即反射光,是一個比對象的顏色不同的顏色。采用暗,而不是明亮的實地查看,可以得到更好的分辨率。
你不需要精密的設(shè)備來得到一個暗場效果,但你需要一個更高強度的光,因為你所看到的只有反射光。在低倍率(高達100倍)任何像樣的光學儀器可以成立,使光線向觀眾,而不是通過直接向觀眾對象反映。
要成立一個“暗場”觀看解剖顯微鏡,標本應(yīng)放置在一個開放,使光線只能從表面蓋玻片和幻燈片之間反映,而不是從表面下方的幻燈片。您可能需要一個獨立舉行的幻燈片。表面下方的開放應(yīng)該是一個扁平的黑色。關(guān)閉所有內(nèi)置照明燈。著眼于一個角度向試樣的高強度光源,通過一個玻璃盤或jar的頂部或側(cè)面。
用復(fù)合顯微鏡,暗場是通過源和冷凝器之間的光路中放置一個閃動的磁盤??梢詼蕚湟粋€閃動的磁盤上的廉價硬幣大小直徑等于幻燈片的寬度不等的黑色電工膠帶切割圓形件,并堅持他們在連續(xù)的幻燈片。圓圈應(yīng)間隔,以及除。標本放在顯微鏡階段像往常一樣,和照明應(yīng)盡可能均勻。如果有一個在冷凝器中的光圈(對比度桿),它應(yīng)該是開辟了廣泛的。后專注于低功耗,閃動的磁盤的幻燈片是放置在源和冷凝器之間的光路,使其盡可能靠近冷凝器的底部,因為它會去。
我將開始與zui大的磁盤,滑動,直到它是直接在光路的中心。增加照明應(yīng)產(chǎn)生良好的暗場效果。要優(yōu)化,首先嘗試停止視場光闌,以獲得的背景和標本之間的對比。嘗試匹配閃動磁盤場直徑的大小,使磁盤的邊緣,外面的教職員領(lǐng)域 - 更小的磁盤適合于更高功率的目標??v向上,磁盤應(yīng)盡可能靠近冷凝器,使對比度zui大的。在配備內(nèi)置的暗場設(shè)備的顯微鏡,觀點是如此令人印象深刻,因為閃動的磁盤內(nèi)置冷凝器 - 非常接近和集中。經(jīng)過測試的設(shè)置這樣一個立場可能被操縱,以適應(yīng)在顯微鏡下的,所以不持有它的幻燈片可放置位置。東西'抓住'冷凝器和支持閃動磁盤將是理想的。越少,學生們亂用,效果更佳。
懸浮細胞和池塘里的水樣本,看起來壯觀的暗場。雖然標本可能看起來沖了出去,在明亮的領(lǐng)域缺乏細節(jié),原生生物,多細胞動物,細胞懸浮物,藻類和其他微生物明確區(qū)分,他們的細節(jié)顯示良好。 100X,您可以很容易地看到細菌,甚至分辨一些結(jié)構(gòu)(棒,桿彎曲,螺旋,或球菌)和運動。非能動菌看起來像一個黑暗的背景振動對亮點。運動型細菌可以看出一個明確的方向移動,有時顯著加快。池塘里的水樣本中,您可能會發(fā)現(xiàn)螺旋菌volutans,一個非常大(可達0.5毫米)的運動型螺旋細菌的。
使用暗場照明時
暗場照明是zui容易在低放大倍率(高達100倍),雖然它可以用于任何干物鏡。任何時候,您要查看的液體樣品中的一切,碎片和所有,暗場是的。即使是微小的塵埃顆粒,是顯而易見的。暗場尋找懸浮細胞特別有用。暗場可以很容易地獲得正確的低倍率小,低對比度標本的焦平面。
使用暗初步檢查,如酵母,細菌,小原生生物,細胞和組織成分,包括臉頰上皮細胞,葉綠體,線粒體,甚至血細胞(直徑小的色素細胞使棘手的發(fā)現(xiàn),盡管他們有時顏色)細胞懸浮液。
· 初步的調(diào)查和觀察池塘里的水樣本,干草或土壤注入,購買原生生物或后生文化低的權(quán)力。
· 考試的淡染幻燈片。任何試樣的體積非常小的初始位置,以供日后觀看更高的功率。