Leica徠卡熒光顯微鏡是用人眼不可見(jiàn)的一定波長(zhǎng)的紫外線作為光源照射被檢物體,使之受激發(fā)而產(chǎn)生人眼可見(jiàn)的熒光,然后再經(jīng)Leica徠卡熒光顯微鏡成象系統(tǒng)放大來(lái)進(jìn)行鏡檢。熒光顯微術(shù)是生物、醫(yī)學(xué)中的重要研究手段,如圣生物組織、生理病理、微生物、醫(yī)藥、食品、化學(xué)等諸方面的鑒定等。
一基本原理
(一)熒光:在中通光是由發(fā)光體質(zhì)點(diǎn)的熱運(yùn)動(dòng)所引起的輻射;而熒光是非溫度輻射,是一種冷光。熒光有多種,如光化熒光、放射熒光、生物熒光、化學(xué)熒光等等。而是利用“光化熒光”這一原理設(shè)計(jì)制造,達(dá)到熒光顯微術(shù)鏡檢的目的。
由于的光源是利用人眼不可見(jiàn)的短波光——紫外線,因而就大大提高了物鏡的分辨率,圖象與背景的反差亦甚為明顯。
(二)熒光現(xiàn)象:在中將熒光物體放到光譜中的各色區(qū)域,就可發(fā)現(xiàn)引起熒光zui有效的光線是光譜上波長(zhǎng)較短的區(qū)域,即近紫外線區(qū)域,波長(zhǎng)紙業(yè)320~400nm。這種現(xiàn)象的實(shí)質(zhì)是分子吸收了短波光的能量,可以發(fā)發(fā)的形式以波長(zhǎng)較長(zhǎng)的熒光射出,而為人眼可見(jiàn),這就是“熒光現(xiàn)象”。熒光接近可見(jiàn)光的紅光端,大部分的熒光現(xiàn)象是符合這一規(guī)律的。熒光現(xiàn)象可分為兩種:
1.*次熒光現(xiàn)象:在中又稱“固有熒光”或“自發(fā)熒光”,當(dāng)經(jīng)紫外線的照射后,就能發(fā)出熒光的物質(zhì)而謂之。
2.第二次熒光現(xiàn)象:在中又稱“繼發(fā)熒光”,當(dāng)經(jīng)紫外線照射后不能或只部分發(fā)生微弱的熒光,這樣就需先熒光素處理,再經(jīng)紫外線照射才能發(fā)生熒光,這是因組織內(nèi)吸附或溶解有熒光素的緣故。
在中熒光色素的種類甚多,大部分為制片技術(shù)中所用的染色劑,對(duì)各種被檢物體表現(xiàn)出不同的親和性。因此,對(duì)熒光色素的選擇、應(yīng)用濃度及處理時(shí)間等儲(chǔ)方面都需摸索和積累經(jīng)驗(yàn)。
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