生物顯微鏡--物鏡的性能
各種物鏡具有不同的光學性能,現(xiàn)在一AE光學顯微鏡的物鏡筒壁上都標刻著物鏡的各種性能參數(shù)。我們以圖3.I中所示的兩個物鏡為例,做一簡要說明。
170;表示聽適用的顯微鏡機械筒長,即從物筋的肩部到目鏡上線的距離為170mm。
0.17:表示物鏡所要求的蓋玻片厚度為0.17mm。
PLAPO;表示物鏡的矯正程度為平面復(fù)消色差,NPL表示標準平面消色差。
100(或40):表示物鏡的放大倍數(shù)為100(或40)倍。
Oe1;表示物鏡的浸潤介質(zhì)為油浸。右邊的物鏡沒有標記這種字母,表示介質(zhì)為空氣的于系物鏡。
0.65:表示物鏡的數(shù)值孔徑(即鏡口率)為0.65,這是決定物鏡性能的非常重要的參數(shù)。
物鏡的這些參數(shù)以及組成物鏡的各個透鏡的特性和相互位置都是計算的結(jié)果,而且物鏡的設(shè)計現(xiàn)在一般是由電子計算機完成的。
物鏡的數(shù)值孔徑。當顯微鏡中間像的位置被固定時,表示光錐大小的光鐵半項角(圖3.2中的角u),即孔徑角對于描述一個物鏡來說是非常重要的參數(shù),它是一個比物鏡的焦距更加實用的特性。任何沒計良好的物鏡的孔徑將能夠表示:①在多遠的給定焦距可以看清標本中的細微結(jié)構(gòu);②當孔徑充滿時可以通過物鏡的光顯量。
在生物顯微鏡中一般用數(shù)值孔徑(N.A.)來表示一個物鏡的孔徑大小,數(shù)值孔徑是標本與物鉸前透鏡之間介質(zhì)的折射率(n)與孔徑角(即光錐半頂角u)正弦的乘積:N.A.=nsinu
自由工作距離,即物銳的下消與標本之間的距離(圖3.2中的PQ),它是物鏡另個非常重要的參數(shù)。由于這個距離不能夠小于0.1mm,因而它在高數(shù)值孔徑的物鏡設(shè)個是一個重要的限制因素。在使用透射光顯微鏡時白由工作距離會受到短波片和封藏質(zhì)的限制。
在現(xiàn)代物鏡中,物鏡的自由工作距離和物鎮(zhèn)長度的總和被規(guī)定為一個固定的數(shù)值。物鏡長度的設(shè)計基于這樣一個原則:較低倍的物鏡具有較少的透競,它被做得較短一些,具有較長的自由工作距離;較高倍的物瓷具有很多透鏡,它被做得鉸長一些,相應(yīng)地具有較短的自由工作匝離。使用——組這樣的物鏡時,在轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換臺更換物鏡后,只需要用細調(diào)稍微聚焦就可以獲得一個清晰的像。當然,正象鏡簡氏度和蓋玻片厚度一樣.物鎮(zhèn)長度和自由工作距離的總和在任何情況下不可能是*統(tǒng)一的,它常常只限于同一個工廠制造的或同一種類型的物鏡系統(tǒng)。
生物顯微鏡一般在標準物鏡中數(shù)值孔徑隨著焦距的誠小而增大.但不是線性的。一定焦距的物鏡所允許的zui大的數(shù)值孔徑不僅取決于物鎊的性能設(shè)計,而且也取決于它的矯正程度。數(shù)值孔徑雖然經(jīng)常隨著放大倍數(shù)的增大而增大,但是在一定的范圍內(nèi)它們可以被看作是獨立的量,因而一個40×的釣鏡可以具有0.65、0.80或0.95的數(shù)值孔徑。由于數(shù)值孔徑是對可以通過物鏡的光束口徑的度量.因此在一系列具有相同焦距的物鏡中,所形成的像的亮度與數(shù)值孔徑的平方呈比例關(guān)系。
生物顯微鏡正如在第二章個所敘述的,物鏡的球面差、場曲率和色差將隨著孔徑的增大而增大,因此對于高數(shù)值孔徑的物鏡來說zui大的問題是俊差和色差的矯正。盡管由于在透鏡復(fù)合體的設(shè)計中使用了計算機,可以制造出高孔徑的物鏡,但是被有效使用的數(shù)值孔徑的zui大限度,實際上與阿貝在1886年所達到的1.25—1.30的數(shù)值相比并沒有增大多少。
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