生物顯微鏡-干涉相襯顯微鏡結(jié)構(gòu)
諾馬斯基(Nomarski)微分干涉相襯顯微術(shù)(簡稱干涉相襯)是20世紀(jì)50年代中期在光學(xué)顯微術(shù)內(nèi)出現(xiàn)的一個新分支,即偏振光的雙光束干涉。與其他雙光束干涉顯微術(shù)相比,主要區(qū)別是:這種顯微術(shù)參加干涉的兩文光束均通過物體,然后借某些方法再合成一束以產(chǎn)生干涉,而不是一支通過物體的光束和另一支不通過物體的所謂參考光束之間的干涉。
干涉相襯能將物體的光學(xué)厚度梯度如實地反映出來,形成其他顯微術(shù)所沒有的三維立體浮雕圖像。
由于微分干涉相襯顯微術(shù)對標(biāo)本的適應(yīng)性較廣,無論標(biāo)本厚與薄,折射率相差是否大,染色與否,是否活體,等等,均能觀察,因此在組織胚胎、血液、神經(jīng)、微生物、生物、流體生物學(xué)及許多無機(jī)物的觀察上得到廣泛的應(yīng)用。
干涉相襯顯微鏡在結(jié)構(gòu)上除物鏡和聚光器外,其他結(jié)構(gòu)與一般生物顯微鏡相同。
聚光器類似于位相顯微鏡的轉(zhuǎn)盤形式,但內(nèi)部安裝了各種倍率用的諾馬斯基棱鏡。使用不同物鏡時,可以轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)盤以選擇相應(yīng)的棱鏡。
為了擴(kuò)大使用范圍,某些轉(zhuǎn)盤內(nèi)有明視場觀察用的空鏡孔。
物鏡有兩種設(shè)計形式。一是每種放大倍率的物鏡各配備一塊諾馬斯基棱鏡,裝配時.棱鏡的相干像平面A’應(yīng)與物鏡像方焦面重合,如圖3—32所示。使用時只要借螺栓橫向移動棱鏡以改變干涉色即可。這種設(shè)計像質(zhì)好,使用方便,但成本較高。另一種設(shè)計是所有物鏡均采用一塊諾馬斯基棱鏡。使用這種裝置時,棱鏡在光軸方向和橫向位置均能調(diào)整。對萊一放大倍數(shù)的物鏡而言,先軸向調(diào)整棱鏡,使相干像面A’與該物鏡像方傷面重合,然后橫向移動棱鏡改變干涉色以取得的觀察效果。這種設(shè)計成本較低,但使用則較為復(fù)雜。
諾馬斯基棱鏡的角很?。s十幾分),厚度為l一左右,其中一塊棱鏡的光軸與底面夾角約在8.5°,通常用石英制造。
干涉相襯顯微鏡中諾馬斯基微分干涉裝置原理圖中1為起偏器,2和8為諾馬斯基棱鏡,3為聚光鏡物方焦面(即干涉平面A).4為聚光鏡,5為物體,6為物鏡,7為物鏡像方焦面(即干涉平面A’).9為檢偏鏡,10為像平面??梢姼缮嫫矫鍭和A’均在諾馬斯基棱鏡2和8之處,滿足了高倍物鏡和聚光鏡的要求。
實際上,內(nèi)于棱鏡的膠合面是一斜面,致使其相應(yīng)的干涉平面也與系統(tǒng)的光軸成一角度,為使干涉平面與系統(tǒng)光軸垂直以便與物鏡(或聚光鏡)的焦面重合,必須將棱鏡相應(yīng)轉(zhuǎn)動一個角度方可。
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